Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
BICD2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405525
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- BICD2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico BICD2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: BICD2 Anticuerpo (E-12): sc-393631
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
BICD2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405525 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
BICD2 (homólogo 2 de bicaudal D) codifica un adaptador del complejo dineína–dinactina que acopla la carga al transporte hacia el extremo menos dependiente de microtúbulos, apoyando el tráfico a larga distancia en células polarizadas como las neuronas. Al vincular vesículas, endosomas y orgánulos con la dineína citoplasmática, BICD2 contribuye a la organización del aparato de Golgi, el posicionamiento de endosomas, la dinámica de la envoltura nuclear y procesos relacionados con el ciclo celular, incluida la orientación del huso. El transporte dependiente de BICD2 se entrecruza con vías que regulan la homeostasis axonal y el tráfico de membranas, donde se requiere una entrega precisa de carga para el mantenimiento neuronal. La variación genética en BICD2 se ha asociado con fenotipos neuromusculares, lo que lo convierte en una diana relevante para estudiar la biología de las neuronas motoras y los defectos del transporte intracelular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO BICD2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BICD2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BICD2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BICD2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BICD2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BICD2 para la investigación de la señalización de BICD2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de BICD2 críticos para la función de BICD2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BICD2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido BICD2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BICD2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BICD2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BICD2 (h) y el plásmido HDR BICD2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BICD2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BICD2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.