BF-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402933
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- BF-1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico BF-1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: BF-1 Anticuerpo (D-12): sc-518188
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
BF-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402933 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen humano FOXG1 codifica el factor de transcripción de tipo forkhead box BF-1, un regulador maestro del patrón telencefálico y del mantenimiento de los progenitores neurales durante el desarrollo cerebral. BF-1 actúa principalmente como un represor transcripcional que se integra con redes de señalización del desarrollo, incluidas Notch, Wnt/β-catenina y programas asociados a TGF-β/BMP, para controlar la proliferación, la diferenciación y la identidad regional. Mediante la modulación de genes del ciclo celular y determinantes del destino neuronal, FOXG1 influye en la neurogénesis cortical y la maduración sináptica. La actividad o la dosis desregulada de FOXG1 se asocia estrechamente con trastornos del neurodesarrollo y con una función alterada de las redes neuronales, lo que lo convierte en un objetivo clave para estudios mecanísticos en modelos de linaje neuronal.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO BF-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FOXG1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FOXG1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FOXG1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BF-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FOXG1 para la investigación de la señalización de BF-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de FOXG1 críticos para la función de BF-1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FOXG1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido BF-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BF-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FOXG1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BF-1 (h) y el plásmido HDR BF-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FOXG1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FOXG1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.