Bex1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422657

Descripción general

BEX1 (brain expressed X-linked 1) codifica una pequeña proteína intracelular enriquecida en tejidos neurales e implicada en la diferenciación neuronal, la guía axonal y el control del ciclo celular. BEX1 participa en redes de señalización vinculadas a las respuestas a neurotrofinas/NGF y puede modular programas transcripcionales al interactuar con proteínas reguladoras que influyen en las vías de supervivencia y de respuesta al estrés. En el sistema nervioso en desarrollo y en el adulto, la alteración de la expresión de BEX1 se ha asociado con cambios en el crecimiento de neuritas y el mantenimiento neuronal, lo que respalda su relevancia para la investigación neurodesarrollativa y neurodegenerativa. También se ha informado de la desregulación de BEX1 en múltiples conjuntos de datos de expresión relacionados con el cáncer, donde se la ha vinculado con fenotipos de proliferación y apoptosis en modelos de biología tumoral.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Bex1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Bex1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Bex1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Bex1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Bex1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Bex1 para la investigación de la señalización de Bex1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Bex1 críticos para la función de Bex1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Bex1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Bex1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Bex1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Bex1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Bex1 (m) y el plásmido HDR Bex1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Bex1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Bex1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.