Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
ATF-6α Antibody (F-7): sc-166659. Western blot analysis of ATF-6α expression in untreated HCT-116 (A), chemically-treated HCT-116 (B, C, D) and K-562 (E) whole cell lysates. β-Actin (C4): sc-47778 used as loading control. Detection reagent used: m-IgG Fc BP-HRP: sc-525409.
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ATF-6α双切口酶质粒(h): sc-400259-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ATF-6α 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- ATF-6α双切酶质粒（h）和ATF-6α双切酶质粒（h2）编码针对ATF6的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：ATF-6α: sc-166659，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ATF-6α双切口酶质粒(h) | sc-400259-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ATF-6α双切口酶质粒(h2) | sc-400259-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
激活转录因子6α（ATF6α）是一种锚定于内质网（ER）膜上的转录因子，是未折叠蛋白反应（UPR）的核心感受器与效应分子。在内质网应激条件下，ATF6α转运至高尔基体，经受调控的膜内蛋白水解释放其N端片段；该片段随后转位入细胞核，诱导分子伴侣及内质网相关降解（ERAD）基因的表达，从而协调蛋白质稳态与分泌通路稳态。ATF6α信号与PERK和IRE1通路相互交叉，在应激适应过程中共同塑造翻译调控、氧化还原平衡以及炎症输出。ATF6通路活性失调与多种以慢性蛋白毒性应激为特征的疾病相关，包括代谢功能障碍、神经退行性变，以及癌症在缺氧和营养受限条件下的适应。
ATF-6α 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ATF6 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ATF6内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ATF6的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ATF6基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。