Plásmido Doble Nickase (h) ASIC2: sc-403265-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ASIC2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ASIC2 (h) y el plásmido de doble nickasa ASIC2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ASIC2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ASIC2 | sc-403265-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ASIC2 | sc-403265-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ASIC2 (subunidad 2 del canal iónico sensible a ácido) codifica un canal catiónico de la familia DEG/ENaC, activado por protones y sensible a la amilorida, que contribuye a la excitabilidad neuronal y a la despolarización de la membrana en respuesta a la acidificación extracelular. En células humanas, ASIC2 puede ensamblarse con otras subunidades ASIC para ajustar la selectividad iónica, la cinética de desensibilización y la sensibilidad al pH, conectando cambios locales de pH con la entrada de Ca2+/Na+ y la señalización posterior. La actividad de ASIC2 se cruza con procesos como la transmisión sináptica, la mecanosensación y la detección del microambiente inflamatorio, donde el pH extracelular fluctúa. Las alteraciones en la expresión de ASIC2 o en la función del canal se han investigado en neurofisiología y en la señalización relacionada con el dolor, y son relevantes para la investigación sobre respuestas neuronales al estrés y vías excitotóxicas.
ASIC2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ASIC2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ASIC2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ASIC2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ASIC2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.