Plasmide Double Nickase (h) ARV1: sc-407460-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ARV1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ARV1 Double Nickase (h) et le plasmide ARV1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ARV1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ARV1 Antibody (4G12): sc-517099
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ARV1 | sc-407460-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ARV1 | sc-407460-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARV1 (régulateur de l’homéostasie lipidique ARV1) code une protéine membranaire multipasse localisée dans le réticulum endoplasmique, impliquée dans l’homéostasie des stérols et des sphingolipides ainsi que dans l’organisation de la membrane du RE. ARV1 contribue au trafic intracellulaire des lipides et peut influencer les réponses au stress du RE et les processus dépendants de la composition membranaire, ce qui la relie à des voies qui régissent le métabolisme lipidique et la gestion des protéines dans le système sécrétoire. Des altérations de la fonction d’ARV1 ont été associées, dans des études génétiques, à des phénotypes neurodéveloppementaux et à des crises d’épilepsie, ce qui concorde avec le rôle de l’équilibre lipidique dans la viabilité et la signalisation neuronales. Dans des modèles cellulaires, la perturbation d’ARV1 peut servir à explorer comment la composition lipidique du RE influence le trafic, la protéostasie et l’adaptation métabolique.
ARV1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ARV1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ARV1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ARV1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ARV1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.