Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
apolipoprotein E/apoE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419167
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- apolipoprotein E/apoE O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico apolipoprotein E/apoE, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:apolipoprotein E/apoE Anticorpo (F-9): sc-390925
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
apolipoprotein E/apoE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419167 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Apoe de camundongo codifica a apolipoproteína E (apoE), uma proteína secretada e associada a lipoproteínas que regula o transporte de colesterol e triglicerídeos no plasma e no sistema nervoso central. A apoE medeia a captação e a redistribuição de lipídios dependentes de receptores por meio de interações com membros da família do receptor de LDL, influenciando a depuração de partículas de lipoproteínas, a homeostase de membranas e as vias de efluxo de colesterol celular. No cérebro, a apoE participa do tráfego lipídico glial, da manutenção sináptica e da sinalização neuroinflamatória, conectando o metabolismo de lipídios à resiliência neuronal. Alterações na função de Apoe são amplamente utilizadas para modelar mecanismos de dislipidemia e aterosclerose, e também são centrais em estudos experimentais de deposição de amiloide, respostas microgliais e processos neurodegenerativos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO apolipoprotein E/apoE (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Apoe em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Apoe, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Apoe na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína apolipoprotein E/apoE.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Apoe para a investigação da sinalização de apolipoprotein E/apoE, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Apoe críticos para a função apolipoprotein E/apoE
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Apoe para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo apolipoprotein E/apoE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo apolipoprotein E/apoE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Apoe. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo apolipoprotein E/apoE Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR apolipoprotein E/apoE (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Apoe para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Apoe definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.