apoC-I Double Nickaseプラスミド (m): sc-419163-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- apoC-I Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- apoC-Iダブルニカースプラスミド（m）およびapoC-Iダブルニカースプラスミド（m2）は、Apoc1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
apoC-I Double Nickaseプラスミド (m) | sc-419163-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
apoC-I Double Nickaseプラスミド (m2) | sc-419163-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
アポリポタンパク質C-I（apoC-I）は、マウスのApoc1遺伝子にコードされる小型の分泌性アポリポタンパク質で、トリグリセリド（中性脂肪）に富むリポタンパク質およびHDLに多く存在し、血漿中の脂質輸送とクリアランス（除去）を調節します。apoC-Iは、リパーゼ活性や肝臓受容体との相互作用を制御することで、リポタンパク質のリモデリングや受容体介在性取り込みに影響を及ぼし、トリグリセリド代謝、コレステロール輸送、全身のエネルギーバランスを司る経路とApoc1を結び付けています。マクロファージをはじめとするミエロイド系細胞区画では、Apoc1の発現は脂質取り扱いプログラムや炎症性シグナル伝達ネットワークと関連し、泡沫細胞の生物学的特性を形成します。apoC-Iの量やApoc1座位の活性が異常になることは、代謝異常や動脈硬化関連プロセスの文脈で研究されており、脂質駆動性炎症の機序研究を支持しています。
apoC-I ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Apoc1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Apoc1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Apoc1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Apoc1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。