APLP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406400

Übersicht

APLP2 (Amyloid-Beta-Precursor-like-Protein 2) ist ein Typ-I-Transmembran-Glykoprotein der APP-Familie, das proteolytisch verarbeitet wird und an Membranprotein-Transportprozessen, Zelladhäsion und Zell-Zell-Signalübertragung beteiligt ist. Es lokalisiert in sekretorische und endozytische Kompartimente und wird mit der Regulation der Endozytose, synaptischen und neuronalen Entwicklungsprozessen sowie Proteostase-Mechanismen in Verbindung gebracht. APLP2 kann Interaktionen mit Komponenten der extrazellulären Matrix und intrazellulären Adapterproteinen modulieren und dadurch die Organisation des Zytoskeletts sowie den Rezeptorumsatz beeinflussen. Eine veränderte Biologie der APP-Familie, einschließlich Expression und Prozessierung von APLP2, wird in Kontexten wie der Neurobiologie und bei Krebszell-Phänotypen untersucht, in denen Änderungen in Adhäsion, Migration und Überlebenssignalwegen relevant sind.

Das APLP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des APLP2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des APLP2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von APLP2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die APLP2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von APLP2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der APLP2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf APLP2-Exone abzielen, die für die APLP2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere APLP2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom APLP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom APLP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des APLP2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das APLP2 HDR-Plasmid (h) und APLP2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von APLP2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten APLP2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.