Plasmide Double Nickase (h) Annexin XI: sc-404879-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Annexin XI correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Annexin XI Double Nickase (h) et le plasmide Annexin XI Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ANXA11. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Annexin XI Antibody (D-12): sc-46686
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Annexin XI | sc-404879-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Annexin XI | sc-404879-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANXA11 code l’annexine XI, une protéine de liaison aux phospholipides dépendante du Ca2+ qui s’associe aux membranes intracellulaires et participe au trafic membranaire, à la dynamique des vésicules et à l’organisation du cytosquelette. L’annexine XI a été impliquée dans des processus endosomaux et lysosomaux, notamment dans le fonctionnement des endosomes tardifs et des voies liées à l’autophagie, et son activité de liaison aux membranes est modulée par la signalisation calcique. Des études cellulaires suggèrent que ANXA11 intervient dans des assemblages sensibles au stress et dans la dynamique des granules d’ARN, ce qui la relie à la protéostasie et à l’homéostasie des organites. Des perturbations génétiques et fonctionnelles de ANXA11 ont été associées à la biologie de maladies neurodégénératives et neuromusculaires, ce qui en fait une cible pertinente pour des recherches mécanistiques sur l’agrégation protéique, le maintien des axones et les réponses cellulaires au stress.
Annexin XI Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ANXA11 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ANXA11. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ANXA11. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ANXA11.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.