Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Annexin IV Double Nickase Plasmid (h): sc-402134-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Annexin IV Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Annexin IV Double-Nickase-Plasmid (h) und Annexin IV Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ANXA4 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Annexin IV: sc-46693
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Annexin IV Double Nickase Plasmid (h) | sc-402134-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Annexin IV Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402134-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANXA4 codiert Annexin IV, ein Ca²⁺-abhängiges phospholipidbindendes Protein, das mit dem inneren Leaflet der Plasmamembran sowie mit Endomembranen assoziiert ist und so Membranorganisation, -krümmung und vesikulären Transport reguliert. Annexin IV ist an Ca²⁺-responsiver Signalübertragung und an der Dynamik des Zytoskeletts beteiligt und beeinflusst Prozesse wie Exozytose, Endozytose und den epithelialen Ionentransport; zudem wird es mit der Modulation der Membranreparatur und zellulären Stressantworten in Verbindung gebracht. Eine veränderte ANXA4-Expression wurde in zahlreichen Tumorkontexten und bei entzündlichen Erkrankungen beschrieben, wo ANXA4 im Hinblick auf Rollen in Zellüberleben, Migration und Medikamentenansprech-Phänotypen untersucht wird. Diese Eigenschaften machen ANXA4 zu einem nützlichen Ziel, um membranassoziierte Signalwege zu analysieren, die für die Epithelbiologie und das Verhalten von Krebszellen relevant sind.
Annexin IV Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ANXA4-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ANXA4 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ANXA4-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ANXA4-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.