ALPPL2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h2): sc-401492-KO-2

概要

ALPPL2は、アルカリホスファターゼ（胎盤様2）をコードしており、細胞表面に存在するGPIアンカー型のエクト酵素として、リン酸モノエステルを加水分解します。細胞外基質の脱リン酸化を調節することで、ALPPL2は局所的なリン酸の利用可能性、膜マイクロドメインにおけるシグナル伝達、ならびに分化に関連したプログラムに影響を及ぼし得ます。特に、上皮系および生殖細胞関連の文脈でその役割が示唆されています。ALPPL2の発現は特定の発生段階を示すマーカーとしてしばしば利用され、また複数のがん関連データセットにおいてALPPL2発現の変化が報告されています。これらの特徴により、ALPPL2は細胞アイデンティティ、細胞表面酵素の生物学、ならびに形質転換に伴う経路リモデリングの研究において重要な対象となります。

ALPPL2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）は、human細胞株におけるALPPL2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ALPPL2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ALPPL2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ALPPL2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ALPPL2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ALPPL2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ALPPL2の機能に不可欠なALPPL2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ALPPL2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ALPPL2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびALPPL2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ALPPL2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ALPPL2 HDRプラスミド（h）および ALPPL2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはALPPL2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のALPPL2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。