Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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alpha Synuclein Double Nickase Plasmid (m): sc-423051-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das alpha Synuclein Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- alpha Synuclein Double-Nickase-Plasmid (m) und alpha Synuclein Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Snca abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: alpha Synuclein: sc-53955
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
alpha Synuclein Double Nickase Plasmid (m) | sc-423051-NIC | 20 µg | $410.00 |
Snca kodiert das murine Alpha-Synuclein, ein präsynaptisches Protein, das an der Steuerung des synaptischen Vesikeltransports, der Assemblierung des SNARE-Komplexes und der Regulation der Neurotransmitterfreisetzung beteiligt ist. Es assoziiert mit Lipidmembranen und kann die Dynamik von Vesikelpools, die Endozytose sowie Proteostase‑Wege einschließlich des Ubiquitin‑Proteasom- und des Autophagie‑Lysosom-Systems beeinflussen. Eine gestörte Alpha‑Synuclein‑Homöostase und Aggregation stehen im Zentrum neurodegenerativer Mechanismen und verknüpfen Snca mit neuronalen Stressantworten, mitochondrialer Dysfunktion und inflammatorischer Signalgebung. Snca wird daher häufig genutzt, um molekulare Ereignisse zu modellieren, die für Synucleinopathien relevant sind, und um neuronale und gliale Signalwege zu untersuchen, die Proteinfehlfaltung und -abbau/-eliminierung prägen.
alpha Synuclein Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Snca-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Snca abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Snca-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Snca-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.