Aldolase C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419083

Visão geral

Aldoc codifica a aldolase C, uma enzima glicolítica que catalisa a clivagem reversível da frutose-1,6-bisfosfato em fosfatos de trioses, conectando a utilização de glicose à produção subsequente de ATP e ao fluxo biossintético. Em tecidos de camundongo, a ALDOC é enriquecida no sistema nervoso central e contribui para a compartimentalização metabólica em neurônios e glia, sustentando processos como neurotransmissão e equilíbrio redox. Para além da glicólise, membros da família das aldolases podem influenciar a organização do citoesqueleto e a transdução de sinais por meio de interações proteína–proteína que acoplam o metabolismo à arquitetura celular. A expressão alterada de ALDOC tem sido utilizada como marcador de estado metabólico e identidade celular em neurobiologia, e a desregulação de programas glicolíticos é amplamente relevante para neurodegeneração, respostas ao estresse isquêmico e modelos de doenças proliferativas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Aldolase C (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Aldoc em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Aldoc, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Aldoc na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Aldolase C.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Aldoc para a investigação da sinalização de Aldolase C, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Aldoc críticos para a função Aldolase C
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Aldoc para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Aldolase C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Aldolase C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Aldoc. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Aldolase C Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Aldolase C (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Aldoc para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Aldoc definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.