Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405313
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 Anticuerpo (G-9): sc-373921
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405313 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
La ALDH3A2 humana (deshidrogenasa de aldehídos grasos, FALDH) es una enzima dependiente de NAD que oxida aldehídos alifáticos de cadena media y larga a sus ácidos grasos correspondientes, limitando la acumulación de aldehídos lipídicos reactivos generados durante el metabolismo de lípidos y el estrés oxidativo. Es un componente clave del catabolismo de alcoholes grasos y esfingolípidos, incluida la degradación de aldehídos grasos derivados del recambio de plasmalógenos y lípidos éter. Al controlar la carga de aldehídos, la ALDH3A2 contribuye a la homeostasis de los lípidos de membrana y al equilibrio redox celular. Las variantes con pérdida de función se asocian con el síndrome de Sjögren–Larsson y se estudian en el contexto de la patología neurocutánea y la toxicidad celular mediada por lípidos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ALDH3A2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ALDH3A2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ALDH3A2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ALDH3A2 para la investigación de la señalización de Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ALDH3A2 críticos para la función de Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ALDH3A2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ALDH3A2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 (h) y el plásmido HDR Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ALDH3A2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ALDH3A2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.