Plásmido Doble Nickase (h) Aldehyde dehydrogenase 1B1/ALDH1B1: sc-404562-NIC

El gen humano **ALDH1B1** codifica una aldehído deshidrogenasa mitocondrial que oxida una amplia gama de aldehídos endógenos y xenobióticos a sus correspondientes ácidos carboxílicos utilizando **NAD(P)+**, lo que contribuye al mantenimiento del equilibrio redox celular y a la detoxificación de aldehídos. Al limitar la acumulación de aldehídos reactivos generados durante la peroxidación lipídica y el metabolismo intermediario, **ALDH1B1** favorece la homeostasis mitocondrial y la protección frente al estrés por carbonilos. Su actividad se relaciona con el manejo de etanol/acetaldehído, el metabolismo de aldehídos vinculados a retinoides y las vías de respuesta al estrés oxidativo que influyen en la proliferación, la diferenciación y la adaptación metabólica. Alteraciones en la expresión de **ALDH1B1** y en los programas enzimáticos de **ALDH** se han asociado con la biología tumoral y fenotipos metabólicos, lo que impulsa su análisis funcional en modelos de cáncer, inflamación y disfunción mitocondrial.

Aldehyde dehydrogenase 1B1/ALDH1B1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ALDH1B1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ALDH1B1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ALDH1B1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ALDH1B1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.