AHNAK Lentiviral Activation Particles (m): sc-425992-LAC

Ahnak kodiert AHNAK, ein großes Scaffold-Protein, das mit der Plasmamembran und dem Zytoskelett assoziiert und so Zellarchitektur, Adhäsion und Signalintegration koordiniert. In Mauszellen wurde AHNAK mit der Kalziumhomöostase und Membranreparaturprozessen in Verbindung gebracht und kann Signalwege modulieren, die auf eine Umgestaltung des Zytoskeletts konvergieren, darunter PKC- und TGF-β-assoziierte Signalübertragung. Über diese Funktionen trägt AHNAK zur Regulation von Zellmigration und Differenzierung bei und ist damit relevant für Studien zu Gewebeumbau und Stressantworten. Eine veränderte AHNAK-Expression oder -Lokalisierung wurde in mehreren Krankheitskontexten beschrieben, was seine Nutzung als mechanistischer Knotenpunkt zur Analyse von Signal‑Struktur‑Beziehungen in biomedizinischen Forschungsmodellen unterstützt.

AHNAK Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Ahnak-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

AHNAK Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Ahnak-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen AHNAK-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Ahnak-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.