Plasmide Double Nickase (h) Ah Receptor: sc-400297-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Ah Receptor correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Ah Receptor Double Nickase (h) et le plasmide Ah Receptor Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant AHR. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Ah Receptor Antibody (A-3): sc-133088
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Ah Receptor | sc-400297-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Ah Receptor | sc-400297-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’AHR humain code le récepteur des hydrocarbures aromatiques (AhR), un facteur de transcription activé par un ligand qui détecte des xénobiotiques et des métabolites endogènes afin de réguler des programmes d’expression génique contrôlant la détoxification, la fonction de barrière et la modulation immunitaire. Après liaison du ligand, l’AHR transloque vers le noyau, forme un hétérodimère avec ARNT et se fixe sur des éléments de réponse aux xénobiotiques pour induire des cibles telles que CYP1A1 et CYP1B1, en s’articulant avec les réponses au stress oxydatif et la signalisation inflammatoire. L’activité de l’AHR s’intègre à des voies incluant NF-κB, WNT/β-caténine et TGF-β, influençant le contrôle du cycle cellulaire, la différenciation et l’homéostasie tissulaire. Une signalisation AHR dérégulée a été impliquée, selon le contexte, dans la biologie tumorale, des états inflammatoires chroniques et des réponses altérées aux expositions environnementales, ce qui soutient son intérêt comme nœud mécanistique en toxicologie et en immunologie.
Ah Receptor Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus AHR dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de AHR. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de AHR. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de AHR.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.