ADAMTS-15 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405885

Descripción general

ADAMTS15 codifica ADAMTS-15, una metaloproteinasa secretada dependiente de zinc de la familia ADAMTS que contribuye a la organización de la matriz extracelular (MEC) mediante el procesamiento proteolítico de componentes de la matriz y la regulación de la remodelación tisular. Al moldear microambientes pericelulares ricos en proteoglicanos y colágeno, ADAMTS-15 influye en la adhesión celular, la migración y las vías de mecanotransducción vinculadas a las interacciones estroma–epitelio. La actividad alterada de ADAMTS15 se ha estudiado en contextos de homeostasis del cartílago y del tejido conectivo, remodelación relacionada con fibrosis y dinámica de la MEC asociada a tumores, donde los cambios en el equilibrio proteasa–inhibidor pueden afectar la invasión y el potencial metastásico. Estas características hacen de ADAMTS-15 un nodo útil para investigar el recambio de la matriz, la señalización del microambiente y las redes de proteasas en sistemas celulares humanos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ADAMTS-15 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ADAMTS15 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ADAMTS15 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ADAMTS15 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ADAMTS-15.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ADAMTS15 para la investigación de la señalización de ADAMTS-15, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ADAMTS15 críticos para la función de ADAMTS-15
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ADAMTS15 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ADAMTS-15 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ADAMTS-15 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ADAMTS15. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ADAMTS-15 (h) y el plásmido HDR ADAMTS-15 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ADAMTS15 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ADAMTS15 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.