ADAM5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418991

Descripción general

Adam5 codifica ADAM5, un miembro de la familia ADAM (una desintegrina y metaloproteinasa) implicada en la proteólisis asociada a membrana y en las interacciones célula–célula o célula–matriz. Las proteínas ADAM pueden influir en el desprendimiento (shedding) del ectodominio de proteínas de superficie, modulando así la dinámica de la señalización, la adhesión y los procesos de remodelación tisular. En sistemas murinos, ADAM5 se estudia en el contexto de la regulación dependiente de proteasas de la biología del desarrollo y la reproducción, con posibles vínculos a vías que gobiernan la comunicación celular y la detección del entorno extracelular. La desregulación de actividades relacionadas de la familia ADAM se asocia con señalización inflamatoria y fenotipos relevantes para el cáncer, lo que convierte a Adam5 en un objetivo útil para estudios mecanísticos de redes de señalización impulsadas por la proteólisis.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ADAM5 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Adam5 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Adam5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Adam5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ADAM5.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Adam5 para la investigación de la señalización de ADAM5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Adam5 críticos para la función de ADAM5
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Adam5 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ADAM5 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ADAM5 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Adam5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ADAM5 (m) y el plásmido HDR ADAM5 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Adam5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Adam5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.