ADAM4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-418990

개요

Adam4는 막 근접부 단백질 분해와 세포–세포 또는 세포–기질 상호작용에 관여하는 ADAM(a disintegrin and metalloprotease) 계열의 구성원인 ADAM4를 암호화합니다. ADAM 단백질은 세포 표면 수용체와 접착 분자의 세포외 도메인 절단( shedding )을 조절하여 신호전달의 역학, 염증성 신호, 조직 재형성에 영향을 줄 수 있습니다. 마우스 시스템에서 ADAM4는 프로테아제 의존적 방식으로 발달 및 생식 과정이 조절되는 맥락, 그리고 미세환경이 세포 행동을 조절하는 맥락에서 연구됩니다. ADAM 계열의 단백질 분해 조절 이상은 병적 재형성과 비정상적 신호전달과 폭넓게 연관되어 있어, 프로테아제 구동형 표현형을 기전적으로 규명하기 위한 단서를 제공합니다.

ADAM4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Adam4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Adam4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Adam4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ADAM4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ADAM4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Adam4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ADAM4 기능에 중요한 Adam4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Adam4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ADAM4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 ADAM4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Adam4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ADAM4 HDR 플라스미드 (m) 및 ADAM4 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Adam4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Adam4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.