ADAM11 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-418982
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- ADAM11 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im ADAM11-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
ADAM11 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-418982 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Adam11 kodiert ADAM11, ein katalytisch inaktives, disintegrinähnliches Protein der ADAM-Familie, das an Zell-Zell- und Zell-Matrix-Interaktionen beteiligt ist und besonders im Nervensystem eine wichtige Rolle spielt. ADAM11 wird mit Prozessen wie neuronaler Differenzierung, Synapsenorganisation und der Modulation adhäsionsabhängiger Signalwege über seine extrazellulären Domänen in Verbindung gebracht. Veränderte ADAM11-Expression sowie genomische Veränderungen wurden in Studien zu neuroentwicklungsbedingten und neurodegenerativen Phänotypen beschrieben; zudem wird ADAM11 im Kontext der Tumorbiologie untersucht, wo Adhäsions- und Migrationsprogramme fehlreguliert sind. Als Mausgen stellt Adam11 ein gut handhabbares System dar, um konservierte, ADAM-vermittelte Mechanismen in neuronalen Schaltkreisen und beim Gewebeumbau zu analysieren.
Das ADAM11 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Adam11-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Adam11-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Adam11 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ADAM11-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Adam11-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ADAM11-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Adam11-Exone abzielen, die für die ADAM11-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Adam11-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom ADAM11 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom ADAM11 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Adam11-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ADAM11 HDR-Plasmid (m) und ADAM11 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Adam11-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Adam11-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.