Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ACSL4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401649-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACSL4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ACSL4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ACSL4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ACSL4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACSL4 Anticorpo (F-4): sc-365230
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACSL4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401649-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACSL4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401649-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A ACSL4 (acil-CoA sintetase, membro 4 da família de cadeia longa) é uma enzima associada à membrana que ativa preferencialmente ácidos gordos poli-insaturados, incluindo o ácido araquidónico, convertendo-os em tioésteres acil-CoA para incorporação em fosfolípidos. Ao moldar a remodelação de fosfolípidos e a dinâmica das gotículas lipídicas, a ACSL4 influencia a disponibilidade de precursores de eicosanoides e redes mais amplas de sinalização lipídica. A atividade da ACSL4 está intimamente ligada à biologia redox e à suscetibilidade à ferroptose através do enriquecimento em fosfolípidos com AGPI (PUFA) passíveis de peroxidação, cruzando-se com vias que controlam o stress oxidativo e a integridade da membrana. Alterações na expressão ou na função da ACSL4 têm sido associadas a desregulação do metabolismo lipídico e a contextos da biologia do cancro, neurobiologia e sinalização inflamatória, tornando-a um nó útil para estudos mecanísticos.
ACSL4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ACSL4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ACSL4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ACSL4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ACSL4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.