ACADS Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405458-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACADSO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ACADS (h) e o Plasmídeo Double Nickase ACADS (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ACADS. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACADS Anticorpo (G-10): sc-365953
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACADS Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405458-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACADS Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405458-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACADS codifica a acil-CoA desidrogenase de cadeia curta, uma flavoproteína mitocondrial que catalisa a etapa inicial de desidrogenação na β-oxidação de acil-CoAs de ácidos graxos de cadeia curta, conectando o catabolismo de ácidos graxos à produção de energia durante o jejum e o estresse metabólico. Ao transferir elétrons para o sistema da flavoproteína de transferência de elétrons e para componentes subsequentes da cadeia respiratória, a ACADS sustenta o equilíbrio redox mitocondrial e um fluxo eficiente pelas vias de oxidação de ácidos graxos. A função alterada de ACADS está associada à oxidação prejudicada de ácidos graxos de cadeia curta, acidose metabólica e sintomas neuromusculares observados na deficiência de acil-CoA desidrogenase de cadeia curta, o que a torna relevante para estudos de erros inatos do metabolismo. A ACADS também oferece um ponto útil para investigar o metabolismo mitocondrial, respostas ao estresse oxidativo e sinalização derivada de lipídios em células humanas.
ACADS O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ACADS em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ACADS. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ACADS. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ACADS interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.