ACAD-9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432841
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ACAD-9 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ACAD-9, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ACAD-9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-432841 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Acad9 codifica al miembro 9 de la familia de las acil-CoA deshidrogenasas (ACAD-9), una flavoproteína mitocondrial que contribuye a la β-oxidación de ácidos grasos y es necesaria para el ensamblaje eficiente del complejo I de la fosforilación oxidativa. A través de sus funciones en la transferencia electrónica mitocondrial y el metabolismo energético, ACAD-9 influye en la homeostasis redox, la producción de ATP y la flexibilidad metabólica en tejidos de alta demanda. La alteración de la función de ACAD9 se asocia con defectos en el ensamblaje del complejo I y fenotipos similares a encefalomiopatías mitocondriales, por lo que es relevante para estudiar el fracaso bioenergético, las respuestas al estrés metabólico y los mecanismos de enfermedad mitocondrial en modelos murinos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ACAD-9 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Acad9 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Acad9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Acad9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ACAD-9.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Acad9 para la investigación de la señalización de ACAD-9, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Acad9 críticos para la función de ACAD-9
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Acad9 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ACAD-9 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ACAD-9 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Acad9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ACAD-9 (m) y el plásmido HDR ACAD-9 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Acad9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Acad9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.