ABR CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407250

Übersicht

ABR (active BCR-related) kodiert ein multidomäniges Rho-GTPase-aktivierendes Protein, das kleine GTPasen wie RAC1 und CDC42 moduliert und dadurch die Dynamik des Aktin-Zytoskeletts, Zelladhäsion, Membrane-Ruffling und vesikulären Transport beeinflusst. Über seine GAP-Aktivität und seine Funktionen als Signal-Scaffold ist ABR an Signalwegen beteiligt, die rezeptorvermittelte Signale mit dem Umbau des Zytoskeletts und der Zellbeweglichkeit koppeln. Veränderte, durch ABR regulierte Rho-GTPase-Signalgebung wurde mit dysregulierten Proliferations- und Migrationsphänotypen in Verbindung gebracht, die für onkogene Transformation und invasives Verhalten relevant sind. ABR wird außerdem im Kontext der Signalübertragung in Immunzellen sowie neurodevelopmentaler Prozesse untersucht, in denen eine präzise Kontrolle der GTPasen der Rho-Familie erforderlich ist.

Das ABR CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ABR-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ABR-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ABR nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ABR-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ABR-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ABR-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ABR-Exone abzielen, die für die ABR-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ABR-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ABR CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom ABR CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ABR-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ABR HDR-Plasmid (h) und ABR HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ABR-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ABR-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.