Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ABCF1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405684
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ABCF1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ABCF1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ABCF1 Anticuerpo (H-3): sc-377185
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ABCF1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405684 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
ABCF1 (miembro 1 de la subfamilia F de las proteínas transportadoras ABC) es una proteína ABC citosólica esencial que carece de dominios transmembrana y funciona principalmente en la iniciación de la traducción y en procesos asociados al ribosoma. Interactúa con componentes del eje eIF2/eIF2B y otros factores de iniciación, vinculando la regulación dependiente de ATP con el control de la síntesis proteica durante el estrés celular y la señalización de la inmunidad innata. ABCF1 también se ha implicado en vías inflamatorias relacionadas con NF-κB y en respuestas desencadenadas por ácidos nucleicos, conectando la regulación de la traducción con programas antivirales y de citocinas. La expresión o actividad desregulada de ABCF1 se ha asociado con proliferación alterada y fenotipos inmunitarios en modelos de cáncer y enfermedades inflamatorias, lo que respalda su uso en estudios mecanísticos sobre la adaptación al estrés y la defensa del huésped.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ABCF1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ABCF1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ABCF1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ABCF1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ABCF1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ABCF1 para la investigación de la señalización de ABCF1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ABCF1 críticos para la función de ABCF1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ABCF1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ABCF1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ABCF1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ABCF1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ABCF1 (h) y el plásmido HDR ABCF1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ABCF1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ABCF1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.