A-Myb Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404328

Descripción general

MYBL1 codifica el factor de transcripción A-Myb, una proteína de unión al ADN específica de secuencia que regula programas de expresión génica vinculados a la progresión del ciclo celular, la diferenciación y la proliferación restringida a linajes celulares. A-Myb actúa dentro de redes transcripcionales que controlan procesos asociados a la cromatina y la señalización de puntos de control, influyendo en la expresión de genes implicados en la replicación del ADN y la entrada en mitosis. La actividad desregulada de MYBL1 o un contexto regulatorio alterado se han asociado con estados proliferativos aberrantes y programas transcripcionales oncogénicos en múltiples tipos de tejido. Como regulador transcripcional nuclear, A-Myb se estudia con frecuencia por su papel en acoplar señales del desarrollo a salidas transcripcionales coordinadas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO A-Myb (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MYBL1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MYBL1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MYBL1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína A-Myb.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MYBL1 para la investigación de la señalización de A-Myb, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MYBL1 críticos para la función de A-Myb
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MYBL1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido A-Myb CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido A-Myb CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MYBL1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR A-Myb (h) y el plásmido HDR A-Myb (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MYBL1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MYBL1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.