2X Laemmli Sample Buffer

Il tampone per campioni 2X Laemmli è un reagente ampiamente utilizzato nella ricerca biochimica e in biologia molecolare, in particolare per la preparazione di campioni proteici per l'elettroforesi su gel di sodio dodecil solfato-poliacrilammide (SDS-PAGE). Questo tampone, che prende il nome dal suo ideatore Ulrich Laemmli, contiene una combinazione di Tris-HCl, SDS, glicerolo, β-mercaptoetanolo (o DTT) e colorante blu di bromofenolo. La composizione del tampone assicura che le proteine siano denaturate, ridotte e caricate uniformemente, facilitando la loro separazione in base al peso molecolare durante l'elettroforesi. Nelle applicazioni di ricerca, il tampone per campioni 2X Laemmli svolge un ruolo cruciale nell'analisi delle proteine. Il componente SDS si lega alle proteine, conferendo una carica negativa proporzionale alla loro lunghezza, che consente la separazione delle proteine esclusivamente in base alle dimensioni quando vengono sottoposte a un campo elettrico. L'agente riducente, il β-mercaptoetanolo o DTT, rompe i legami disolfuro, garantendo la completa denaturazione delle proteine e la risoluzione accurata dei singoli polipeptidi. Il glicerolo aumenta la densità del campione, assicurando che affondi nei pozzetti del gel, mentre il blu di bromofenolo serve come colorante di tracciamento per monitorare il progresso dell'elettroforesi. I ricercatori si affidano al tampone per campioni 2X Laemmli per preparare i campioni per varie applicazioni a valle, come il Western blotting, la spettrometria di massa e altre analisi proteomiche. La preparazione coerente e affidabile dei campioni contribuisce alla caratterizzazione dettagliata dell'espressione proteica, delle modifiche post-traduzionali e delle interazioni proteina-proteina, rendendola indispensabile nello studio dei processi cellulari e delle vie biochimiche.