Plásmido Doble Nickase (h) 17β-HSD3: sc-403863-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)17β-HSD3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa 17β-HSD3 (h) y el plásmido de doble nickasa 17β-HSD3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HSD17B3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) 17β-HSD3 | sc-403863-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) 17β-HSD3 | sc-403863-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSD17B3 codifica la 17β-HSD3 humana, una oxidorreductasa microsomal que cataliza la conversión dependiente de NADPH de la androstenediona a testosterona, un paso clave en la biosíntesis de andrógenos. Esta enzima actúa dentro de redes metabólicas de hormonas esteroideas que modulan la señalización del receptor de andrógenos y los programas transcripcionales posteriores que afectan al desarrollo sexual y a la fisiología reproductiva. La actividad de HSD17B3 contribuye a la disponibilidad de andrógenos específica de cada tejido mediante el metabolismo intracrino de esteroides y se integra con vías más amplias que regulan el flujo esteroidogénico y el equilibrio redox. Las alteraciones en la función o la expresión de HSD17B3 se estudian en el contexto de trastornos del desarrollo sexual y fenotipos endocrinos dependientes de andrógenos, así como en los mecanismos del metabolismo de esteroides en tejidos gonadales y periféricos.
17β-HSD3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HSD17B3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HSD17B3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HSD17B3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HSD17B3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.