Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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γ-catenin Plasmide Double Nickase (m): sc-421210-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- γ-catenin Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il γ-catenin Double Nickase Plasmid (m) e il γ-catenin Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Jup. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: γ-catenin Antibody (A-6): sc-514115
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
γ-catenin Plasmide Double Nickase (m) | sc-421210-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
γ-catenin Plasmide Double Nickase (m2) | sc-421210-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Jup codifica la γ-catenina (plakoglobina), una proteina con ripetizioni armadillo che collega le giunzioni aderenti basate sulle caderine e i desmosomi al citoscheletro, sostenendo l’integrità dei tessuti epiteliali e cardiaci nel topo. Partecipa all’assemblaggio delle giunzioni, alla meccanotrasduzione e al crosstalk con la segnalazione Wnt/β-catenina tramite competizione per partner di legame come TCF/LEF e i complessi della caderina. Alterazioni della funzione o della localizzazione della γ-catenina sono associate a un’adesione cellula–cellula compromessa, a una differenziazione aberrante e a cambiamenti della segnalazione che influenzano il rimodellamento tissutale. Studi in vivo e su cellule collegano Jup a fenotipi simili a cardiomiopatia e a difetti della barriera epiteliale, rendendolo un nodo utile per indagare la biologia delle giunzioni e l’integrazione dei segnali.
γ-catenin Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Jup nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Jup. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Jup. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Jup interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.