Date published: 2026-7-15

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ΔN p73双切口酶质粒(h): sc-437274-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • ΔN p73 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • ΔN p73双切酶质粒(h)和ΔN p73双切酶质粒(h2)编码针对的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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    ΔN p73双切口酶质粒(h)

    sc-437274-NIC
    20 µg
    $410.00

    ΔN p73双切口酶质粒(h2)

    sc-437274-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    ΔN p73 是人类 TP73 的一种 N 端截短亚型,缺失经典的转录激活结构域,并可作为 p53 家族转录程序的显性负调控因子。通过调节 DNA 损伤应答、细胞凋亡与细胞周期控制,ΔN p73 会影响与 p53/p63 依赖性基因调控相交织的应激信号网络。在多种癌症背景中,ΔN p73 表达异常与肿瘤发生及治疗耐受表型相关,机制之一是其破坏促凋亡与细胞周期检查点通路。其活性也与上皮与神经谱系中的分化与生存决策有关,因此是研究亚型特异性转录调控的一个有用节点。

    ΔN p73 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。