α2C-AR Plasmide Double Nickase (h): sc-404948-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- α2C-AR Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il α2C-AR Double Nickase Plasmid (h) e il α2C-AR Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ADRA2C. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
α2C-AR Plasmide Double Nickase (h) | sc-404948-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
α2C-AR Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404948-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADRA2C codifica il recettore adrenergico umano alfa2C (α2C-AR), un GPCR accoppiato a Gi/Go che modula il rilascio di neurotrasmettitori e il tono della muscolatura liscia in risposta alle catecolamine. L’attivazione del recettore inibisce l’adenilil ciclasi riducendo i livelli di cAMP, regola l’attività dei canali ionici e attiva la segnalazione MAPK/ERK, contribuendo a modellare la trasmissione sinaptica e la reattività vascolare. L’α2C-AR partecipa al feedback presinaptico come autorecettore ed è coinvolto nella segnalazione adrenergica sensibile allo stress, collegandosi così alla regolazione del flusso simpatico. Alterazioni dell’espressione o della funzione di ADRA2C sono state studiate nella biologia di patologie neuropsichiatriche e cardiovascolari, anche in contesti caratterizzati da una disregolazione della segnalazione catecolaminergica e del tono vascolare.
α2C-AR Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ADRA2C nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ADRA2C. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ADRA2C. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ADRA2C interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.