α3C Tubulin Plasmide Double Nickase (h): sc-400020-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- α3C Tubulin Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il α3C Tubulin Double Nickase Plasmid (h) e il α3C Tubulin Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TUBA3C. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
α3C Tubulin Plasmide Double Nickase (h) | sc-400020-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
α3C Tubulin Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400020-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TUBA3C codifica per la tubulina umana α3C, un componente fondamentale dei microtubuli che sostiene l’architettura del citoscheletro, il trasporto intracellulare e la formazione dinamica del fuso mitotico durante la mitosi. Attraverso una polimerizzazione regolata con altre isoforme di tubulina α/β, la tubulina α3C contribuisce a processi dipendenti dai microtubuli, tra cui la polarità cellulare, il traffico vescicolare e la segregazione dei cromosomi, integrandosi con vie di segnalazione che controllano la progressione del ciclo cellulare e il rimodellamento del citoscheletro. Alterazioni della dinamica dei microtubuli e della composizione degli isotipi di tubulina sono spesso associate a instabilità genomica e proliferazione disregolata, rendendo la biologia della tubulina ampiamente rilevante per lo studio del comportamento delle cellule tumorali e delle funzioni cellulari nello sviluppo neurobiologico. Come parte della rete della tubulina, TUBA3C è utile anche per analizzare come le perturbazioni del citoscheletro influenzino il posizionamento degli organelli, le risposte allo stress e la fedeltà della mitosi.
α3C Tubulin Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TUBA3C nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TUBA3C. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TUBA3C. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TUBA3C interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.