Plasmide Double Nickase (m) Zscan4c: sc-434121-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) ZSCAN4C correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZSCAN4C Double Nickase (m) et le plasmide ZSCAN4C Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Zscan4c. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Zscan4c | sc-434121-NIC | 20 µg | $410.00 |
Zscan4c (zinc finger et domaine SCAN contenant 4C) est un facteur de transcription murin principalement associé à l’état « two-cell–like » au début de l’embryogenèse ainsi qu’à certains sous-ensembles de cellules souches pluripotentes. Il est impliqué dans des programmes de stabilité du génome, notamment la régulation de la longueur des télomères, la réparation de l’ADN et le remodelage de la chromatine, et a été associé à l’activation de réseaux transcriptionnels propres au stade de clivage. L’activité de la famille Zscan4 est couramment étudiée dans le contexte de la reprogrammation épigénétique, de l’expression génique associée à la totipotence et du maintien de l’intégrité génomique sous stress réplicatif. Le dérèglement de ces processus est pertinent pour comprendre des anomalies du développement et des phénotypes d’instabilité génomique, susceptibles d’éclairer des modèles de transformation oncogénique et de dysfonctionnement des cellules souches.
ZSCAN4C Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Zscan4c dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Zscan4c. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Zscan4c. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Zscan4c.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.