Plasmide Double Nickase (h) ZnT-1: sc-403094-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ZnT-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZnT-1 Double Nickase (h) et le plasmide ZnT-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLC30A1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ZnT-1 | sc-403094-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ZnT-1 | sc-403094-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC30A1 code pour le transporteur humain du zinc ZnT‑1, un transporteur d’efflux situé à la membrane plasmique qui limite l’accumulation cytosolique de Zn2+ et contribue au maintien de l’homéostasie des ions métalliques. En couplant l’exportation du zinc aux réponses cellulaires au stress, ZnT‑1 influe sur l’équilibre rédox, les programmes transcriptionnels dépendants des métaux et la protection contre la cytotoxicité induite par le zinc. Des altérations de l’activité de SLC30A1 ont été associées à une perturbation de la signalisation du zinc pouvant affecter l’excitabilité neuronale, la fonction de barrière épithéliale et l’activation des cellules immunitaires. La dérégulation des voies de transport du zinc est liée à la neurodégénérescence, à des dysfonctionnements métaboliques et à des phénotypes inflammatoires, faisant de SLC30A1 un point d’entrée utile pour des études mécanistiques de la biologie dépendante des métaux.
ZnT-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLC30A1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLC30A1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLC30A1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLC30A1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.