Plasmide CRISPR/Cas9 KO ZNF703 (h): sc-406411

Présentation

ZNF703 (protéine à doigt de zinc 703) est un régulateur transcriptionnel nucléaire impliqué dans le contrôle de programmes d’expression génique liés à la différenciation épithéliale, à la progression du cycle cellulaire et à la spécification des lignages. En tant que membre de la famille NET/NLZ, ZNF703 peut agir au sein de complexes de répression transcriptionnelle et de complexes associés à la chromatine afin de moduler la signalisation du développement et les réseaux transcriptionnels en aval. Une expression dérégulée de ZNF703 a été associée à des phénotypes de prolifération et de migration altérés et est fréquemment étudiée dans le contexte de la biologie de l’amplicon 8p12 dans la recherche sur le cancer du sein. Ces caractéristiques font de ZNF703 une cible utile pour l’étude des circuits régulateurs pilotés par des facteurs de transcription, des états transcriptionnels oncogéniques et des dépendances aux voies de signalisation dans des modèles cellulaires humains.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ZNF703 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène ZNF703 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du ZNF703, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert ZNF703 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ZNF703.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en ZNF703 pour l'étude de la signalisation de ZNF703, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de ZNF703 essentiels à la fonction de ZNF703
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de ZNF703 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le ZNF703 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le ZNF703 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus ZNF703. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le ZNF703 plasmide HDR (h) et le ZNF703 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie ZNF703 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles ZNF703 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.