Plasmide Double Nickase (h) ZNF598: sc-413866-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ZNF598 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZNF598 Double Nickase (h) et le plasmide ZNF598 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ZNF598. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ZNF598 | sc-413866-NIC | 20 µg | $410.00 |
ZNF598 code une ligase E3 de l’ubiquitine qui agit comme un capteur et effecteur clé du contrôle qualité associé aux ribosomes, en particulier lors des blocages de traduction et des collisions entre ribosomes. En ubiquitinylant des protéines de la petite sous-unité ribosomique, ZNF598 favorise des événements en aval qui résolvent les complexes de traduction bloqués et coordonnent la surveillance de l’ARNm et des polypeptides naissants. Cette activité s’intègre à la signalisation ubiquitine–protéasome et aux réponses au stress traductionnel qui préservent la protéostasie dans des conditions telles que des défauts d’ARNm ou le stress oxydatif. La dérégulation des voies de contrôle qualité des ribosomes est impliquée dans la vulnérabilité cellulaire aux stress protéotoxiques et neurodégénératifs, faisant de ZNF598 un nœud pertinent pour des études mécanistiques sur la fidélité de la traduction et l’adaptation au stress.
ZNF598 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ZNF598 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ZNF598. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ZNF598. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ZNF598.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.