ZNF575 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-430383

Descripción general

El gen murino Zfp575 codifica la proteína de dedos de zinc ZNF575, un presunto regulador transcripcional con capacidad de unión al ADN dentro de la familia de dedos de zinc tipo C2H2, que a menudo se asocia con el control específico de secuencia de la expresión génica. Aunque la anotación funcional sigue siendo limitada, las proteínas de esta clase suelen modular programas transcripcionales asociados a la cromatina que influyen en el estado celular, la diferenciación y las respuestas a señales del desarrollo o ambientales. Por ello, ZNF575 es relevante para investigar redes de regulación génica y mecanismos epigenéticos que moldean la transcripción específica de tejidos. La desregulación del control transcripcional mediado por dedos de zinc se asocia ampliamente con proliferación alterada, inestabilidad genómica y firmas de expresión vinculadas a enfermedades, lo que respalda estudios exploratorios de Zfp575 en estos contextos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZNF575 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Zfp575 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Zfp575 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Zfp575 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZNF575.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Zfp575 para la investigación de la señalización de ZNF575, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Zfp575 críticos para la función de ZNF575
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Zfp575 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ZNF575 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ZNF575 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Zfp575. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZNF575 (m) y el plásmido HDR ZNF575 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Zfp575 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Zfp575 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.