ZNF526 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431684

Descripción general

Zfp526 codifica la proteína de dedos de zinc de ratón ZNF526, un presunto factor nuclear de unión al ADN implicado en la regulación transcripcional mediante interacciones mediadas por dedos de zinc tipo C2H2 con elementos reguladores. Al igual que muchas proteínas de dedos de zinc asociadas a KRAB, se espera que ZNF526 participe en el silenciamiento génico dependiente de la cromatina y en la modulación de programas transcripcionales específicos de linaje que influyen en el estado celular y la diferenciación. La expresión alterada o la desregulación de factores de transcripción con dedos de zinc puede perturbar redes de control epigenético y vías de señalización posteriores, lo que proporciona un marco para estudiar mecanismos de regulación génica relevantes para fenotipos del desarrollo y desequilibrios transcripcionales asociados a enfermedad. El análisis funcional de Zfp526 respalda investigaciones sobre cómo las interfaces entre factores de transcripción y cromatina dan forma a la expresión génica y a la homeostasis celular en sistemas de modelos murinos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZNF526 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Zfp526 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Zfp526 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Zfp526 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZNF526.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Zfp526 para la investigación de la señalización de ZNF526, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Zfp526 críticos para la función de ZNF526
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Zfp526 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ZNF526 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ZNF526 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Zfp526. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZNF526 (m) y el plásmido HDR ZNF526 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Zfp526 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Zfp526 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.