Plasmide Double Nickase (h) ZNF138: sc-417406-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ZNF138 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZNF138 Double Nickase (h) et le plasmide ZNF138 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ZNF138. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ZNF138 | sc-417406-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ZNF138 | sc-417406-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZNF138 code une protéine à doigts de zinc contenant un domaine KRAB, dont on prédit qu’elle agit comme un régulateur transcriptionnel spécifique de séquence, en couplant la liaison à l’ADN par des doigts de zinc C2H2 au silençage épigénétique via des complexes corépresseurs associés au KRAB. En recrutant des facteurs modifiant la chromatine, ZNF138 devrait influencer l’organisation de l’hétérochromatine, la répression transcriptionnelle et le maintien de programmes d’expression génique spécifiques de certains types cellulaires. La dérégulation des réseaux KRAB‑ZNF a été associée à une stabilité du génome altérée, à une différenciation aberrante et à des états transcriptionnels oncogéniques, ce qui soutient l’étude de ZNF138 dans des voies de régulation génique pertinentes pour les maladies. ZNF138 humain constitue donc une cible utile pour étudier le contrôle de la transcription dépendant de la chromatine et son impact sur le phénotype cellulaire.
ZNF138 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ZNF138 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ZNF138. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ZNF138. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ZNF138.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.