ZFYVE28 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412894

Visão geral

ZFYVE28 codifica uma proteína que contém um domínio FYVE, capaz de reconhecer fosfatidilinositol 3-fosfato nas membranas endossomais, conectando a sinalização por fosfoinositídeos ao tráfego de membranas e à triagem de proteínas. Por meio de interações com componentes da maquinaria endocítica, ZFYVE28 está implicado na regulação da internalização de receptores, na maturação de endossomos e na organização espacial de complexos de sinalização. Esses processos se cruzam com vias que controlam a renovação de receptores de fatores de crescimento e a dinâmica da sinalização a jusante, tornando ZFYVE28 relevante para estudos de atenuação de sinal e transporte vesicular. A desregulação do tráfego endossomal e da triagem dependente de fosfoinositídeos está associada a alterações na homeostase celular e tem sido implicada em múltiplos contextos relevantes para doenças, incluindo fenótipos proliferativos e neurobiológicos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ZFYVE28 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ZFYVE28 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ZFYVE28, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ZFYVE28 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ZFYVE28.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ZFYVE28 para a investigação da sinalização de ZFYVE28, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ZFYVE28 críticos para a função ZFYVE28
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ZFYVE28 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ZFYVE28 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ZFYVE28 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ZFYVE28. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ZFYVE28 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ZFYVE28 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ZFYVE28 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ZFYVE28 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.