Plasmide Double Nickase (h) ZFP106: sc-405869-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ZFP106 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZFP106 Double Nickase (h) et le plasmide ZFP106 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ZNF106. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ZFP106 | sc-405869-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ZFP106 | sc-405869-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZNF106 code pour ZFP106, une protéine à doigts de zinc impliquée dans le métabolisme nucléaire de l’ARN et la régulation de programmes d’expression génique qui soutiennent l’homéostasie des cellules neuronales et musculaires. ZFP106 a été associée au traitement de l’ARN et à la stabilité des transcrits, la reliant à des voies qui coordonnent la différenciation, les réponses au stress et le maintien de types cellulaires à longue durée de vie. Des études génétiques relient le dysfonctionnement de ZNF106 à des phénotypes neuromusculaires et neurodégénératifs, cohérents avec des rôles dans l’intégrité des motoneurones et l’entretien musculaire. Ces caractéristiques font de ZNF106 une cible pertinente pour étudier comment des facteurs de gestion de l’ARN façonnent la vulnérabilité cellulaire et les changements transcriptionnels associés à la dégénérescence.
ZFP106 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ZNF106 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ZNF106. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ZNF106. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ZNF106.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.