ZFP101 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423758
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ZFP101 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ZFP101, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ZFP101 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423758 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen murino **Zfp101** codifica **ZFP101**, una proteína de dedo de zinc tipo C2H2 predicha, implicada en la unión al ADN de manera específica de secuencia y en la regulación de la transcripción. Como factor nuclear putativo, ZFP101 puede contribuir al control de la expresión génica asociado a la cromatina, coordinando programas que dirigen transiciones del estado celular como la proliferación, la diferenciación y la transcripción en respuesta al estrés. La alteración de redes reguladoras mediadas por dedos de zinc es ampliamente relevante para los mecanismos que subyacen a fenotipos del desarrollo y a la transcripción desregulada observada en enfermedades complejas, incluido el cáncer y los trastornos del neurodesarrollo. Por lo tanto, **Zfp101** sirve como un locus útil para investigar cómo los represores/activadores transcripcionales moldean la señalización downstream y los patrones de expresión a escala genómica en sistemas modelo de ratón.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZFP101 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Zfp101 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Zfp101 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Zfp101 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZFP101.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Zfp101 para la investigación de la señalización de ZFP101, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Zfp101 críticos para la función de ZFP101
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Zfp101 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ZFP101 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ZFP101 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Zfp101. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZFP101 (m) y el plásmido HDR ZFP101 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Zfp101 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Zfp101 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.