Plasmide Double Nickase (m) ZEB1: sc-423302-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) ZEB1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZEB1 Double Nickase (m) et le plasmide ZEB1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Zeb1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) ZEB1 | sc-423302-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) ZEB1 | sc-423302-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Zeb1 code pour le homeobox 1 à doigts de zinc se liant aux E-box (ZEB1), un facteur de transcription spécifique de séquence qui se fixe sur des motifs E-box afin de coordonner la transition épithélio-mésenchymateuse (TEM), la polarité cellulaire et la plasticité de lignée. Dans les modèles murins, ZEB1 intègre la signalisation TGF-β/SMAD et co-régule des réseaux de microARN tels que la famille miR-200, remodelant des programmes transcriptionnels qui contrôlent l’adhésion, la migration et la différenciation. ZEB1 module la chromatine et la transcription via des interactions avec des corépresseurs, notamment CtBP, et d’autres régulateurs épigénétiques, reliant des signaux développementaux à des états d’expression génique stables. Une activité dérégulée de ZEB1 est associée à des programmes de type TEM aberrants et à une différenciation altérée dans des modèles pertinents pour les maladies, ce qui en fait une cible fréquente d’études mécanistiques sur les voies de l’invasion, de la fibrose et de la progression tumorale.
ZEB1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Zeb1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Zeb1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Zeb1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Zeb1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.