Plasmide Double Nickase (h) ZDHHC5: sc-411833-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ZDHHC5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZDHHC5 Double Nickase (h) et le plasmide ZDHHC5 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ZDHHC5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ZDHHC5 | sc-411833-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ZDHHC5 | sc-411833-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZDHHC5 code une palmitoyltransférase de la famille DHHC qui catalyse la S-acylation des protéines substrats, régulant ainsi leur association à la membrane, leur trafic et la stabilité des composants de signalisation. Grâce à des cycles dynamiques de palmitoylation, ZDHHC5 influence des processus tels que la localisation des récepteurs et des canaux ioniques, le recyclage endocytaire et l’organisation des jonctions cellule–cellule ainsi que des membranes synaptiques. Ces activités relient ZDHHC5 à des voies qui contrôlent le remodelage du cytosquelette et la transduction du signal au niveau de la membrane plasmique et des compartiments endosomaux. Une palmitoylation protéique dérégulée a été associée à la signalisation oncogénique, à la neurobiologie et à des phénotypes inflammatoires, ce qui fait de ZDHHC5 une cible pertinente pour étudier comment les modifications lipidiques ajustent l’homéostasie cellulaire dans les cellules humaines.
ZDHHC5 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ZDHHC5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ZDHHC5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ZDHHC5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ZDHHC5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.