Plasmide Double Nickase (h) ZC3H4: sc-411693-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ZC3H4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZC3H4 Double Nickase (h) et le plasmide ZC3H4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ZC3H4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ZC3H4 | sc-411693-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ZC3H4 | sc-411693-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZC3H4 code une protéine de liaison à l’ARN à doigt de zinc de type CCCH, impliquée dans le métabolisme nucléaire des ARN et le contrôle transcriptionnel. Les données actuelles relient ZC3H4 à la régulation de la terminaison de la transcription par l’ARN polymérase II ainsi qu’au traitement des transcrits naissants, influençant les programmes d’expression génique et la surveillance des ARN nucléaires. En modulant le devenir des ARN à l’interface chromatine–ARN, ZC3H4 peut affecter des voies qui contrôlent les transitions d’état cellulaire, les réponses au stress et la prolifération. Une dérégulation de la terminaison transcriptionnelle et du traitement des ARN est fréquemment observée dans le cancer et d’autres troubles de l’expression génique, ce qui fait de ZC3H4 une cible utile pour des études mécanistiques de ces processus.
ZC3H4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ZC3H4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ZC3H4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ZC3H4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ZC3H4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.