Plasmide Double Nickase (h) ZBP1: sc-406434-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ZBP1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZBP1 Double Nickase (h) et le plasmide ZBP1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ZBP1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ZBP1 Antibody (H-9): sc-271483
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ZBP1 | sc-406434-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ZBP1 | sc-406434-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZBP1 (Z-DNA binding protein 1, également connu sous le nom de DAI) est un capteur de l’immunité innée qui reconnaît les acides nucléiques en conformation Z et couple leur détection à des programmes inflammatoires et de mort cellulaire. Par des interactions dépendantes du RHIM avec RIPK3 et d’autres partenaires de signalisation, ZBP1 peut favoriser des réponses nécroptotiques et apoptotiques et moduler l’expression des gènes stimulés par l’interféron en aval de la détection de pathogènes. Il est intégré aux voies de défense antivirale et contribue à la régulation de NF-κB et de la signalisation de l’interféron de type I en réponse à une infection ou à un stress endogène lié aux acides nucléiques. Une activité dérégulée de ZBP1 a été associée à une inflammation aberrante et à des pathologies immuno-médiées, ce qui en fait une cible pertinente pour étudier les mécanismes des maladies inflammatoires et les interactions hôte–pathogène.
ZBP1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ZBP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ZBP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ZBP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ZBP1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.