Plasmide Double Nickase (m) YY2: sc-437263-NIC

Le gène murin **Yy2** code **YY2**, un facteur de transcription à doigts de zinc **C2H2** apparenté à **YY1**, qui se lie à des éléments d’ADN riches en GC et module l’activité des promoteurs afin de façonner des programmes d’expression génique. YY2 a été impliqué dans le contrôle transcriptionnel lié à l’organisation de la chromatine, à la régulation du développement et à des réseaux de gènes associés au cycle cellulaire, où il peut agir, selon le contexte, comme activateur ou répresseur. Par ces fonctions régulatrices, Yy2 constitue un levier pour étudier les circuits transcriptionnels et la dynamique de liaison à l’échelle du génome qui influencent l’identité cellulaire et les réponses au stress. La dérégulation des programmes transcriptionnels de la famille YY est pertinente dans des modèles de prolifération et de différenciation aberrantes, ce qui soutient l’intérêt de Yy2 comme cible de recherche dans des études mécanistiques de la régulation génique.

YY2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Yy2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Yy2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Yy2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Yy2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.