Plasmide Double Nickase (m) YY1: sc-423752-NIC

Le gène murin **Yy1** code le facteur de transcription multifonctionnel **YY1**, une protéine à doigts de zinc se liant à l’ADN, capable d’agir comme activateur ou répresseur transcriptionnel selon le contexte de la chromatine. YY1 participe à la communication promoteur–enhancer, au silençage génique associé aux complexes Polycomb et à la régulation de la transcription par l’ARN polymérase II, ce qui le relie à des processus tels que le contrôle du cycle cellulaire, la différenciation et la spécification des lignages. Par ses interactions avec des remodeleurs de la chromatine et des complexes modifiant les histones, YY1 influence les états épigénétiques et l’organisation du génome, notamment via des rôles dans la fonction des enhancers et le bouclage de la chromatine en 3D. Une activité dérégulée de YY1 a été associée à des programmes transcriptionnels altérés pertinents pour des anomalies du développement, la régulation immunitaire et des voies oncogéniques, faisant de **Yy1** une cible largement utilisée pour des études mécanistiques de la régulation génique.

YY1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Yy1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Yy1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Yy1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Yy1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.